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轉錄組與miRNA聯合分析闡明百合胚胎發育的分子機制

2017-04-20

      超過80%綠色植物生命循環的中心是胚胎,且植物體細胞胚被廣泛應用于種質保護,基因工程育種以及人工種子生產領域。MicroRNAs在植物體細胞胚發育(SE)的調節過程中起關鍵作用,但目前為止SE各個階段的分子調節機制仍不明確。

今年3月,沈陽農業大學孫紅梅教授課題組在《Frontiers in plant science》雜志發表一篇題為“Small RNA and transcriptome Sequencing Reveal a Potential miRNA-Mediated Interaction Network that Functions during Somatic Embryogenesis in Lilium pumilum DC.fisch”的文章,通過高通量轉錄組以及small RNA測序的方法,探討細葉百合中SE不同階段的分子調節機制,并構建了該植物SE階段中的miRNAs-靶標調控網絡。


1. 研究目的


本文對細葉百合的6種不同的SE樣品進行轉錄組和small RNA測序研究,探討SE不同階段基因表達的動態變化過程,并對miRNAs目標基因進行預測。我們的研究結果為進一步探索SE的關鍵基因奠定了基礎,并闡述了百合屬的體細胞胚發生過程機理。


2. 研究方法


分別收集6組細葉百合不同階段的SE樣品,采用Illumina Hieq測序平臺進行small RNA以及轉錄組測序。對經過質量控制的數據首先進行基因功能注釋,并進行差異表達富集分析,qRT-PCR驗證。


3. 分析結果


本研究總共獲得452個已知的miRNAs,57個新的miRNAs和40個miRNA*s。SE不同階段差異表達的已知miRNAs被鑒定。隨后,12個差異表達miRNAs的表達水平和4個靶標基因通過qRT-PCR驗證。同時轉錄組測序共組裝66422個基因,其中38004和15497個基因被分別注釋到GO和KEGG中。且在這些基因當中,2182個轉錄本被預測為396個已知的miRNAs的靶標,這些miRNAs靶基因的功能主要富集在細胞分化,細胞分裂和代謝過程等GO term,在KEGG中富集的主要路徑為碳水化合物代謝,激素信號傳導等。

該研究中轉錄組及small RNA測序及信息分析工作由上海派森諾生物科技股份有限公司完成。


4. 參考文獻

Zhang J, Xue B, Gai M, Song S, Jia N and Sun H(2017) Small RNA and Transcriptome Sequencing Reveal a Potential miRNA-Mediated Interaction Network that Functions During Somatic Embryogenesis in Lilium pumilum DC. Fisch.. Front. Plant Sci. 8:566. doi:10.3389/fpls.2017.00566


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